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基因組dna提取注意事項(xiàng)有哪些?
基因組dna提取注意事項(xiàng)有哪些?
加入時(shí)間:2016-06-07 10:49:58 當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:3728
基因組dna提取是近年來(lái)的一個(gè)熱詞,今天小編就要和大家來(lái)聊一聊基因組dna提取注意事項(xiàng)有哪些? 首先,我們要知道DNA是遺傳信息的載體,它是最重要的生物信息分子,更是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,然而為了進(jìn)行測(cè)序、雜交、基因表達(dá)、文庫(kù)構(gòu)建等試驗(yàn),如何獲得高分子量和高純度的基因組DNA則是試驗(yàn)的重要前提。 基因組dna提取的原則是必須保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性(因?yàn)檫z傳信息全部?jī)?chǔ)存在核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)中,故完整的一級(jí)結(jié)構(gòu)是保證核酸結(jié)構(gòu)與功能研究的基礎(chǔ))。還要排除其它分子(如蛋白質(zhì)、多糖、脂類、有機(jī)溶劑等)的污染,使下游試驗(yàn)順利進(jìn)行。 正因?yàn)榛蚪Mdna的重要性,所以在提取是一定要切記相關(guān)注意事項(xiàng),具體如下: 1.防止內(nèi)源性DNase,裂解緩沖液中的EDTA使DNA免遭DNase的降解。 2.保證得到高分子量的基因組DNA, 在制備基因組DNA過(guò)程中應(yīng)減少物理機(jī)械作用,防止基因組DNA的損傷。 3.保證基因組DNA不被蛋白質(zhì)所污染,否則將影響限制性內(nèi)切酶對(duì)DNA的酶切作用。
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