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單細(xì)胞全基因組測(cè)序試劑盒的應(yīng)用有哪些
加入時(shí)間:2016-07-04 11:35:27  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:3476

  單細(xì)胞基因組測(cè)序是基于單個(gè)細(xì)胞水平上采取高質(zhì)量的全基因組擴(kuò)增與測(cè)序相結(jié)合的一項(xiàng)新技術(shù),用于揭示細(xì)胞群體差異和細(xì)胞進(jìn)化關(guān)系。其原理是將分離的單個(gè)細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得高覆蓋率的完整的基因組后進(jìn)行高通量測(cè)序用于揭示細(xì)胞群體差異和細(xì)胞進(jìn)化關(guān)系。

  首先,單個(gè)細(xì)胞是天然重組產(chǎn)生的單倍體,取材方便,而且一個(gè)人身上可取的單個(gè)細(xì)胞數(shù)量幾乎是無(wú)限的,可以很容易地研究個(gè)人水平的重組分布規(guī)律;其次,單細(xì)胞全基因組測(cè)序技術(shù)提供了極高的分子標(biāo)記密度,減少了偏差,能夠得到極為準(zhǔn)確的片段交叉重組定位結(jié)果,可以非常清晰地揭示片段交叉重組的分布以及個(gè)人水平上重組率的分布規(guī)律;第三,測(cè)序技術(shù)本身具有高通量、自動(dòng)化等特點(diǎn),隨著未來(lái)測(cè)序成本的進(jìn)一步降低,可以對(duì)一個(gè)人更多的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)序,從而獲得精度更高的個(gè)體特異性的重組率分布圖譜,也可以通過(guò)比較很多人的單個(gè)細(xì)胞來(lái)研究重組率分布在不同個(gè)體之間的差異。

  國(guó)產(chǎn)品牌普朗醫(yī)療研發(fā)的全基因組擴(kuò)增是一種對(duì)全部基因組序列進(jìn)行非選擇性擴(kuò)增的技術(shù),其目的是在沒(méi)有序列傾向性的前提下大幅度增加DNA的總量。 采用MDA(多重鏈置換擴(kuò)增)的方法,能夠在16個(gè)小時(shí)之內(nèi),將ng甚至是pg級(jí)的微量DNA有效擴(kuò)增至10-40μg高覆蓋度的全基因組DNA。

  這款產(chǎn)品在進(jìn)行酶擴(kuò)增步驟之前基因組DNA必須先進(jìn)行變性,該反應(yīng)通常在烈性反應(yīng)條件下進(jìn)行,如在較高的溫度下孵育(熱孵育)或增加pH值(化學(xué)堿性孵育)。REPLI-g Kit采用溫和堿性孵育法,在DNA斷裂或去堿基化發(fā)生頻率非常低的情況下讓使其均勻地變性。這樣擴(kuò)增得到的DNA具有非常高的完整性,擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度達(dá)到極大化,從而使基因組中的位點(diǎn)和序列都得以均勻呈遞。使用REPLI-g,能確保在后續(xù)的下游應(yīng)用中獲得無(wú)假陽(yáng)性或陰性數(shù)據(jù)存在的可靠結(jié)果;該法不同于其他使用熱變性法的WGA技術(shù),后者可能會(huì)對(duì)模板DNA造成損壞,導(dǎo)致擴(kuò)增偏差并產(chǎn)生不具代表性位點(diǎn)。

                          普朗全基因組擴(kuò)增試劑盒

                         (普朗醫(yī)療品牌----全基因組擴(kuò)增試劑盒

  產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

  高產(chǎn)量:ng級(jí)微量樣本經(jīng)擴(kuò)增后可獲得10-20μg的DNA產(chǎn)物(普通型);

  pg級(jí)微量樣本經(jīng)擴(kuò)增后可獲得30-40μg的DNA產(chǎn)物(高效型);

  高覆蓋度:微量基因組樣本擴(kuò)增后可達(dá)95%以上的覆蓋度;

  操作簡(jiǎn)單:?jiǎn)喂懿僮鳌?步完成、無(wú)需純化、操作時(shí)間短;

  高保真度:所用的DNA Polymerase具有較高的保真性;

  高均一度:基于無(wú)偏好性的MDA的擴(kuò)增,可實(shí)現(xiàn)全基因組的均一擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物平均片段長(zhǎng)度大于20kb;

  設(shè)備要求低:只需無(wú)熱蓋的PCR儀或者水浴鍋就可完成整個(gè)反應(yīng)。

  看了上面的介紹,如果你還想了解普朗醫(yī)療其他的產(chǎn)品如笑氣吸入鎮(zhèn)痛系統(tǒng)牙科x光機(jī)等,歡迎來(lái)電咨詢:400-6656-888。

 

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