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正確使用洗板機(jī)的三個(gè)關(guān)鍵參數(shù)
加入時(shí)間:2024-03-12 09:45:58  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:1108   標(biāo)簽:洗板機(jī) 

在現(xiàn)代臨床實(shí)驗(yàn)室中,洗板機(jī)是一種至關(guān)重要的設(shè)備。它通過有效清洗酶標(biāo)板,去除殘留物質(zhì),顯著提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。盡管洗板機(jī)減少了人為誤差,加快了處理速度,并確保了操作條件的一致性,正確使用洗板機(jī)仍需遵循三個(gè)關(guān)鍵參數(shù):洗滌量、洗滌次數(shù)以及抽吸設(shè)置。

洗板機(jī)

1. 洗滌量

洗滌量是決定洗滌效果的主要因素。自動(dòng)洗板機(jī)負(fù)責(zé)分配洗滌液,若遇到高背景信號(hào)問題,應(yīng)增加洗滌量,建議超過包被體積。洗滌量不足可能導(dǎo)致部分分析表面未被清潔,從而增加背景信號(hào)。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須保持一致。

ELISA試劑盒通常會(huì)指定洗滌量,建議使用350μl的洗滌液以確保整個(gè)反應(yīng)孔內(nèi)壁得到徹底清潔。一般而言,洗滌量越大,殘留的抗體或抗原就越少。

2. 洗滌次數(shù)

洗滌次數(shù)是另一個(gè)影響洗滌效果的關(guān)鍵參數(shù)。多次洗滌可以降低背景信號(hào),但過多的洗滌次數(shù)可能會(huì)削弱信號(hào)強(qiáng)度,導(dǎo)致難以準(zhǔn)確測(cè)量。通常做法是在每次抗體或抗原孵育后進(jìn)行三次重復(fù)洗滌。對(duì)于用戶自行包被的ELISA板,需要特別優(yōu)化洗滌次數(shù)。

為了控制洗滌量和次數(shù),可以考慮加入過量的洗滌液。例如,96孔板的每個(gè)孔通常能容納330至460 μl,而某些自動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)定程序分配多達(dá)1 ml的洗滌液,同時(shí)打開吸液功能避免溢出。

3. 抽吸設(shè)置

抽吸過程中的參數(shù)也會(huì)影響洗滌效果。包括吸液高度和吸入位置,這些參數(shù)需要調(diào)整以減少背景信號(hào)和孔間差異。
吸液高度對(duì)殘留量有顯著影響;如果吸頭距離反應(yīng)孔底部過遠(yuǎn),殘留量會(huì)急劇增加。相反,如果吸頭壓住反應(yīng)孔底部,也會(huì)降低吸液效率,增加殘留量。

現(xiàn)代洗板機(jī)多采用浮動(dòng)型洗頭,其吸頭在洗滌過程中可自由移動(dòng),簡(jiǎn)化了吸液高度的優(yōu)化過程。對(duì)于使用多種類型板的實(shí)驗(yàn)室,浮動(dòng)型洗頭更為方便。

抽吸位置同樣重要;單一抽吸點(diǎn)雖常見且快速,但需要優(yōu)化抽吸位置以達(dá)到較好效果。理想的位置通常位于孔中間與孔壁之間。

此外,反應(yīng)孔的形狀也會(huì)影響殘留量。C形底(圓角平底)的微孔板通常比尖角平底的微孔板具有更低的殘留量。

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